臺式大容量離心機的分離技術是根據(jù)顆粒在一個實用離心場合中的狀態(tài)而發(fā)展起來的新技術。不同密度、大小或形狀的顆粒在不同的離心場合中沉降,所以一個大體是球形非均一的混合物,可以用離心的方法加以分離,應用離心機是為了進一步研究生物化學分離大量的物質。例如收集細胞,分離血漿,從這些預純化的制劑中分離DNA和蛋白質分子,并可分離出病毒以及大規(guī)模大腸桿菌,嚴細胞成分,核蛋白微粒等。
臺式大容量離心機在生物行業(yè)主要用于各種生物樣品的分離、純化和制備:
1.低速離心機主要用于細胞、細胞核、細胞膜的沉淀和收集等;
2.高速離心機主要用于制備和收集微生物、細胞碎片、大的細胞器等;
3.超高速離心機主要用于分離、提純、鑒定和分析線粒體、微粒體、染色體、溶酶體、質粒、大分子核酸、高分子蛋白質等。
臺式大容量離心機的分離條件確定無外乎這幾點:
1.轉速
離心力大小取決于轉子的轉速和離心半徑。在說明離心條件時,低速離心通常以轉子每分鐘的轉數(shù)(rpm)表示。在高速離心,特別是超高速離心時,往往用相對離心力(RCF)表示。實際工作中,離心力通常指相對離心力的平均值,即離心管中點的離心力。
2.分離時間
分離時間因離心方法不同而有差別:對于差速離心,分離時間是指顆粒*沉降到離心管底的時間;對于速率區(qū)帶離心,分離時間是指形成界限分明的區(qū)帶的時間;對于等密度區(qū)帶離心,分離時間是指顆粒*到達等密度點的平衡時間;對于速率區(qū)帶離心所需的區(qū)帶形成時間和等密度區(qū)帶離心所需的平衡時間,影響因素很復雜,可通過試驗確定。
3.分離溫度
為防止分離物質的凝集、變性和失活,除了注意離心介質的選擇外,還必須控制好分離溫度,分離溫度一般控制在4℃左右。對于熱穩(wěn)定性較好的物質,可在室溫下進行離心分離。在高速離心或超高速離心時,轉子高速旋轉會發(fā)熱從而引起溫度升高,必須采用冷凍系統(tǒng),使溫度保持在一定范圍內。
4.介質溶液PH值
離心介質溶液PH值應該處于分離物質穩(wěn)定的PH范圍內,必要時可采用緩沖液。另外,過酸、過堿可能引起轉子和離心機其它部件的腐蝕,應盡量避免。